PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)

1.操作簡(jiǎn)便

應(yīng)用PCR方法的早期階段操作縈瑣，因?yàn)槭褂玫木酆献硎谴竽c桿菌DNA聚合酶I的大片段，即Klenow片段，而不是耐高溫的TaqDNA聚合酶，而且操作也未實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。目前使用的是耐高溫的TaqDNA聚合酶，其操作也實(shí)行了電腦控制的DN八擴(kuò)增儀的自動(dòng)化，只要將擴(kuò)增反應(yīng)所需要的特定程序輸入DNA自動(dòng)擴(kuò)增儀，操作臺(tái)PCR操作箱把反應(yīng)所需要的全部材料混合均勻，置入儀器內(nèi)，反應(yīng)就會(huì)按照所輸入的正確程序進(jìn)行。如果需要，還可隨時(shí)予以調(diào)整。

2. 省時(shí)

應(yīng)用TaqDNA聚合酶時(shí)，單核昔酸摻入的速率較高，75℃一80℃時(shí)，每個(gè)酶分子每秒鐘可完成150個(gè)核昔合成.PCR每一周期需數(shù)分種，所以，一般取用20一30個(gè)周期能使目的DNA達(dá)到數(shù)百萬(wàn)倍擴(kuò)增的反應(yīng)只需數(shù)小時(shí)即可完成.在基因分離，突變體構(gòu)建，DNA測(cè)序等方面，PCR方法均較之常規(guī)方法快速得多.例如，乾蕓GENIN PCRroom-1st操作臺(tái)PCR操作箱用常規(guī)方法建立cDNA文庫(kù)或染色體DNA文庫(kù)來(lái)分離基因，需花幾個(gè)月時(shí)間，用PCR方法只要1一2個(gè)周;用M13法構(gòu)建突變體需l一2個(gè)月，用PCR法僅用數(shù)天;PCR方法擴(kuò)增的目的DN段可直接用作測(cè)序分析，較常用的通過(guò)克隆，培養(yǎng)擴(kuò)增，純化制備等步驟獲得測(cè)序片段更為簡(jiǎn)便，省時(shí)。

3.靈教度高

PCR產(chǎn)物的生成，是以指數(shù)方式增加的，所以欲擴(kuò)增pg量級(jí)的起始物到雌水平成放大真核細(xì)胞單拷貝基因，通過(guò)PCR方法都是不難完成的。PCR方法還可用單一雙倍體細(xì)胞，一根頭發(fā)，甚至單一精子進(jìn)行DNA定型。

4.特異性強(qiáng)

作為引物的寡聚核昔酸與模板結(jié)合的正確性是決定反應(yīng)產(chǎn)物是否特異的關(guān)鍵。TaqDNA聚合酶耐高溫的性質(zhì)，使得反應(yīng)中引物與模板退火的步驟可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的目的DN段也能保持很高的正確程度。

5.對(duì)原始材料質(zhì)t要求低

由于PCR技術(shù)有高靈敏度和強(qiáng)特異性，故僅含量(Pg,ng水平)的目的DNA的粗制品或者總DNA，就可以作為反應(yīng)起始材料來(lái)獲取目的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物。部分的降解的DNA材料也可以通過(guò)PCR多次反應(yīng)周期，最終得到所需的含全長(zhǎng)序列的DN段.用石蠟包埋的組織切片，甚至幾千年前出土的文物，只需經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)奶幚恚|GENIN PCRroom-1st操作臺(tái)PCR操作箱都可用PCR技術(shù)進(jìn)行目的DNA的擴(kuò)增，這樣就有可能對(duì)系統(tǒng)保存的病理材料進(jìn)行檢測(cè)，解決以前無(wú)法解決的問(wèn)題，同時(shí)，這一特性也使PCR技術(shù)應(yīng)用到考古學(xué)，人類(lèi)學(xué)等領(lǐng)域成為可能。

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