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首頁行業新聞 液相色譜儀6大檢測器是什么?讀完本篇文章你就懂了![必讀]

液相色譜儀6大檢測器是什么?讀完本篇文章你就懂了![必讀]

2021年10月16日16:01 

  液相色譜儀6大檢測器是什么?檢測器的作用是將色譜柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為可供檢測的信號,從而定性定量分析待測組分。需要掌握不同檢測器的原理。液相色譜儀常用的檢測器包括紫外檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發光散射檢測器、化學發光檢測器、質譜檢測器等。液相色譜儀6大檢測器是什么下面就和天恒儀器小編一起來看看吧。

天恒

  紫外檢測器(UVD)

  是目前液相色譜中應用最廣泛的檢測器。自然界中大部分有機物和部分無機物都具有紫外吸收能力,UV檢測器根據化合物對紫外光的吸收能力,通過二極管將光信號轉變為電信號,從而進行分析。它有兩個流通池,一個作參比,一個作測量用,光源發出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關。

  使用過紫外檢測器的人應該都會發現,很多標準方法中都是以254nm作為檢測波長的,那為什么是這個波長呢?因為在液相色譜檢測器的發展過程中使用最久的是低壓汞燈,而汞的最大發射波長是253.7nm,也就是說在254nm波長下,燈能量最高,檢測靈敏度最好。但現階段,很多紫外檢測器采用的是氘燈,這時候254nm的檢測波長其實意義不大,氘燈的使用范圍一般是190-800nm,需要考慮化合物的最大吸收波長并且避開流動相的吸收干擾來選擇合適的檢測波長。這就限制了其流動相的選擇范圍,一般檢測波長要避開溶劑截止波長20nm以上。

  熒光檢測器(FLD)

  是目前液相色譜靈敏度最高的檢測器,應用廣泛,選擇性強。適用于能激發熒光的化合物。很多與生命科學有關的物質,如氨基酸、胺類、維生素、甾族化合物及某些代謝藥物都可以用熒光法檢測。熒光檢測器在生物樣品痕量分析中具有重要作用,尤其在用熒光衍生后,可以檢測很微量的氨基酸和肽。在實驗過程中需要嚴格脫氣,因為系統中殘留的氧氣會引發熒光淬滅反應,造成峰面積大幅下降甚至不出峰。

  示差折光檢測器(RID)

  是一種通用型檢測器,利用物質的折光效應,對所有物質均有響應,只要被測組分與洗脫液的折光指數有差別就可使用。生命科學中常遇到各類糖類化合物、脂肪烷烴等,沒有紫外吸收,一般常用示差折光檢測器。它的通用性比UVD廣,但靈敏度要低,對溫度變化敏感,是所有檢測器中對溫度要求最高的。另外,不同的流動相比例,其密度或者折光系數不同,如果流動相比例發生改變,則會引起基線的持續變化,因此示差折光檢測器只能采用等度洗脫,不能采用梯度洗脫,這也限制了它的使用。

  蒸發光散射檢測器(ELSD)

  也是一種通用型的檢測器,原理是利用光散射效應,可檢測揮發性低于流動相的任何樣品,通過霧化器去除溶劑,讓化合物形成懸浮顆粒,從而形成散射效應。ELSD靈敏度比RID高,對溫度變化不敏感,基線穩定,可用于梯度洗脫,并且可在沒有標準品和化合物結構參數未知的情況下檢測未知化合物,但不能使用不揮發的鹽類溶劑,而要用醋酸銨之類的揮發性緩沖鹽來代替。現在ELSD已被廣泛應用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測。

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