紫外分光光度計根本作業原理和紅外光譜儀類似，使用必定頻率的紫外可見光照耀被剖析的有機物質，導致分子中價電子的躍遷，它將有挑選地被吸收。一組吸收隨波長而改變的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內，關于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因而測量光譜可以進行定性剖析，而且根據吸收與已知濃度的標樣的對比，還能進行定量剖析。

紫外-可見分光光度計

紫外-可見分光光度計的類型很多，但可概括為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。

1、單光束分光光度計

經單色器分光后的一束平行光，輪番經過參比溶液和樣品溶液，以進行吸光度的測定。這種簡便型分光光度計結構簡略，操作方便，維修容易，適用于慣例剖析。

2、雙光束分光光度計

經單色器分光后經反射鏡分解為強度持平的兩束光，一束經過參比池，一束經過樣品池。光度計能主動對比兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經對數變換將它變換成吸光度并作為波長的函數記載下來。

雙光束分光光度計通常都能主動記載吸收光譜曲線。由于兩束光一起別離經過參比池和樣品池，還能主動消除光源強度改變所導致的差錯。

3、雙波長分光光度計

由同一光源宣布的光被分紅兩束，別離經過兩個單色器，得到兩束不同波長1和2 的單色光;使用切光器使兩束光以必定的頻率替換照耀同一吸收池，然后經過光電倍增管和電子控制系統，最后由顯示器顯示出兩個波利益的吸光度差值。關于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)剖析，以及存在布景攪擾或共存組分吸收攪擾的情況下，使用雙波長分光光度法，通常能進步辦法的靈敏度和挑選性。使用雙波長分光光度計，能取得導數光譜。

經過光學系統變換，使雙波長分光光度計能很方便地轉化為單波長作業方式。假如能在1和2處別離記載吸光度隨時刻改變的曲線，還能進行化學反應動力學研討

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