色譜柱老出問(wèn)題怎么辦？色譜柱在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常都會(huì)用到，但是同樣的，很多人因?yàn)閷?duì)于色譜柱了解不多，在使用色譜柱時(shí)就會(huì)導(dǎo)致色譜柱出現(xiàn)各種各樣的問(wèn)題，很多人遇到這種情況就不知道怎么辦了，那么色譜柱老出問(wèn)題怎么辦？下面就給大家詳細(xì)介紹一下。

色譜柱常見(jiàn)問(wèn)題：

01

C18柱子如何調(diào)PH和溫度以提高分離度呢？

答：通過(guò)調(diào)整pH和柱溫優(yōu)化分離度，這是方法開發(fā)中非常重要的手段。簡(jiǎn)單來(lái)講，中性或不可電離化合物對(duì)pH變化不敏感。對(duì)于可電離化合物而言，可以通過(guò)調(diào)整流動(dòng)相pH值，控制化合物電離狀態(tài)來(lái)改變化合物的反相保留。降低pH可增大酸性化合物保留，而提高pH則可增加堿性化合物保留。通過(guò)調(diào)整pH改變化合物保留進(jìn)而優(yōu)化各個(gè)組分之間的分離度。

通常提高柱溫使得傳質(zhì)加快，保留也會(huì)降低，但是不同化合物保留對(duì)溫度變化敏感程度不同，因此也可以通過(guò)調(diào)整柱溫改變各個(gè)組分的保留時(shí)間來(lái)優(yōu)化分離度。

02

色譜柱總超壓可能是什么原因呢？

答：超壓一般是液相流路內(nèi)部包括色譜柱在內(nèi)可能有堵塞。需要先做分段排查確定堵塞的部位，再根據(jù)堵塞部位排查引起堵塞的可能原因。

如果是色譜柱堵塞，比較常見(jiàn)的原因有很多，如樣品臟、基質(zhì)復(fù)雜并且沒(méi)有經(jīng)過(guò)良好的預(yù)處理，或者預(yù)處理之后進(jìn)入液相系統(tǒng)后又析出從而造成堵塞或污染（解決方法：加強(qiáng)樣品預(yù)處理）；色譜柱超壓或超出pH范圍使用導(dǎo)致填料碎裂，碎屑顆粒堵塞色譜柱（解決方法：根據(jù)測(cè)試條件選擇合適色譜柱，避免超范圍使用）；儀器使用過(guò)程中部件磨損碎屑造成的堵塞（解決方法：及時(shí)更換受損部件）等等，都會(huì)引起系統(tǒng)色譜柱壓力升高。

03

C18柱子出峰時(shí)間拖后是什么因素影響？用一段時(shí)間出峰時(shí)間就拖后了，請(qǐng)問(wèn)與流動(dòng)相有沒(méi)有關(guān)系？

答：液相色譜中影響化合物保留的主要因素包括：樣品，色譜柱，流動(dòng)相（流速，組成，比例等），柱溫等。使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間漂移的話，需要從以下幾個(gè)影響因素進(jìn)行排查：可以先通過(guò)對(duì)比保留時(shí)間漂移前后相同條件下的壓力曲線是否重現(xiàn)，從而初步排查可能的原因。若壓力曲線不重現(xiàn)，首先確認(rèn)測(cè)試條件是否有改動(dòng)，檢查流動(dòng)相流速，組成，比例等是否改變，是否存在漏液或進(jìn)氣泡引起的流速和比例變化；對(duì)流動(dòng)相組成變化敏感的樣品和方法，應(yīng)確保每次配制流動(dòng)相的重現(xiàn)性；檢查色譜柱是否堵塞污染；儀器控溫是否準(zhǔn)確等等，可能的原因比較多，具體原因需要進(jìn)一步排查。

04

色譜柱用什么流動(dòng)相保存最好？用純有機(jī)試劑是否容易干？

答：反相柱可以用HPLC級(jí)的甲醇或者乙腈保存，注意緊密連接堵頭。正常情況下只要堵好堵頭，溶劑是不容易干的。當(dāng)然在保存溶劑中添加5%-10%的水，也沒(méi)有問(wèn)題。

以上就是色譜柱的常見(jiàn)問(wèn)題，我們?cè)谑褂蒙V柱的過(guò)程中一定要留心，掌握了解決方法，就算出現(xiàn)了這些問(wèn)題我們也不用慌張，著手解決就可以了。如需繼續(xù)了解色譜柱相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊，歡迎閱讀《哪些化學(xué)因素會(huì)影響色譜柱的性能，做好防護(hù)才能用的更好[行業(yè)熱點(diǎn)]》。